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反相色譜柱的使用步驟說明

更新時(shí)間:2023-07-27瀏覽:1528次
反相色譜柱是一種廣泛應(yīng)用于化學(xué)分析和制備中的柱,可以用于生化、醫(yī)藥和環(huán)境分析等領(lǐng)域,具有廣泛的應(yīng)用前景。反相色譜柱的基本結(jié)構(gòu)包括填料和殼體,填料是柱中的主要分離介質(zhì),通常由高度純化的硅膠或氧化鋁等介質(zhì)制成,這些填料具有在分離過程中不受破壞的化學(xué)性質(zhì),以保證分離結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性;殼體是支撐填料的柱殼,通常由不銹鋼或玻璃制成,以承受高壓的流體。
 
反相色譜柱的工作原理是利用化學(xué)相性不同的化學(xué)物質(zhì)與填料之間的親疏性差異,在適當(dāng)?shù)牧魉傧路蛛x化學(xué)混合物的各個(gè)組分。它的分離基于化合物的親水性和疏水性的差異,即疏水化合物會(huì)更容易與柱中的疏水相互作用,從而更容易被吸附。
 
使用步驟說明:
 
1、樣品的預(yù)處理:
反相色譜柱不適用于水溶性分子,因此在樣品上柱之前,需要將其溶解在乙腈、甲醇、乙醇等有機(jī)溶劑中,并使用過濾器過濾掉懸浮顆粒和雜質(zhì)。
 
2、樣品進(jìn)樣:
樣品進(jìn)樣的方法有兩種:手動(dòng)進(jìn)樣和自動(dòng)進(jìn)樣。手動(dòng)進(jìn)樣可以直接將樣品用注射器吸入色譜柱中,而自動(dòng)進(jìn)樣則需要一些特定的儀器來實(shí)現(xiàn)。
 
3、流動(dòng)相的選擇:
選擇合適的流動(dòng)相是反相色譜柱的關(guān)鍵。一般來說,低極性的流動(dòng)相可以用于疏水性大的化合物,而高極性的流動(dòng)相則用于極性化合物。
 
4、它的保養(yǎng):
產(chǎn)品需要進(jìn)行定期的保養(yǎng)以保持最佳的使用效果。保養(yǎng)方法包括柱溫的控制、反沖洗,以及及時(shí)更換使用壽命結(jié)束的柱等。
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