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陰陽(yáng)離子交換色譜柱的色譜行為

更新時(shí)間:2019-06-27瀏覽:3038次
   陰陽(yáng)離子交換色譜柱的色譜行為
  磺酸基陽(yáng)離子交換固定相是一種常見(jiàn)的陽(yáng)離子交換固定相,離子交換功能基為苯磺酸,通常將其健合在有機(jī)聚合物基質(zhì)(如苯乙烯-乙基乙烯苯)或硅膠基質(zhì)上,前者耐酸堿,常用于離子色譜法分析無(wú)機(jī)陽(yáng)離子,后者機(jī)械性強(qiáng),常用于普通HPLC分析有機(jī)化合物陽(yáng)離子。
  以硅膠為基質(zhì)的磺酸基陽(yáng)離子交換固定相簡(jiǎn)稱(chēng)為SCX,功能基團(tuán)為大多為苯磺酸。目前市面上有多種品牌,pH適用范圍一般為2~8,磺酸基均以離子型存在,為強(qiáng)陰陽(yáng)離子交換色譜柱。本文主要探討組分在SCX柱上的保留行為。
  基于疏水作用的色譜行為
  SCX固定相除磺酸基陽(yáng)離子交換位點(diǎn)外,還有苯基這一疏水作用位點(diǎn),其保留作用類(lèi)似于苯基固定相,主要是疏水作用和與含雙鍵組分的π-π相互作用。
  甲苯在SCX柱上的保留行為。甲苯作為一種電中性的強(qiáng)疏水性化合物,與固定相之間不存在離子交換作用,也不存在與極性磺酸基團(tuán)間的親水相互作用,甲苯的保留,可以視為與固定相上苯基相互作用的結(jié)果,其保留隨著流動(dòng)相中有機(jī)相比例增大而減小,也與疏水作用色譜原理吻合。
  對(duì)于疏水性強(qiáng)的陽(yáng)離子化合物,該疏水作用會(huì)成為組分保留的一種重要的方式之一,有時(shí)這種作用甚至?xí)?qiáng)于離子交換作用。
  陰陽(yáng)離子交換色譜柱既有聚合物基質(zhì)色譜柱也有硅膠基質(zhì)色譜柱。然而,不像在反相的領(lǐng)域硅膠柱占絕大部分占有率,離子交換模式中聚合物色譜柱和硅膠色譜柱使用頻率相近。陰陽(yáng)離子交換色譜柱在蛋白質(zhì),核酸等生物化學(xué)領(lǐng)域被廣泛利用。絕大多數(shù)重組蛋白純化都要用到離子交換。離子交換色譜的基礎(chǔ)是高分辨率,可以直接放大規(guī)模應(yīng)用在工業(yè)上,柱再生容易,還可以使蛋白濃縮。
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