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解讀HPLC色譜柱和UHPLC色譜柱相似但不相同的點(diǎn)

更新時(shí)間:2018-07-24瀏覽:5129次
1. HPLC色譜柱和UHPLC色譜柱這兩款柱子是類似的。當(dāng)然,不同系列的柱子可能配備其他的類型的色譜柱會(huì)有差異。Plus的只配備了同填料的制備柱;而XDB則同時(shí)配備了毛細(xì)管柱及制備柱;有同類型的制備柱這就方便我們從分析柱上無縫轉(zhuǎn)移我們的方法到制備柱上。
2. 關(guān)于色譜柱的其他型號(hào)規(guī)格,諸如內(nèi)徑,粒徑,配備的柱長就不多敘述,這點(diǎn)中就能比較清晰的看見兩個(gè)不同型號(hào)的色譜柱配備了哪些規(guī)格的色譜柱。(這里的規(guī)格是指大家工作過程當(dāng)中zui常說的柱長/粒徑/內(nèi)徑)
3. 我們主要看下其填料類型:HPLC色譜柱和UHPLC色譜柱兩款色譜柱都是TMS雙封端(除plus系列中的苯基柱未封端)。溫度上限均為60℃,pH使用范圍為2.0——9.0.載碳量是我們平常除了第2條中的型號(hào)外比較關(guān)心的一個(gè)參數(shù)。通常我們說,載碳量大,保留更強(qiáng)。從這里我們可以看出來,以C18為例,XDB(10%)比plus(9%)應(yīng)當(dāng)保留更強(qiáng)。
4. 說到這里,說的都是HPLC色譜柱和UHPLC色譜柱兩款柱子一樣的參數(shù)。那他們不一樣的地方在哪里呢?——孔徑和比表面積。這兩者的參數(shù)也直接影響到載碳量??讖皆叫〉奶盍希缺砻娣e也會(huì)越大。從而可能導(dǎo)致載碳量更大。這點(diǎn)從上述兩個(gè)系列的對(duì)比可以看出來。Plus孔徑大,其比表面積就較XDB小,而恰好,XDB的載碳量就高于plus那么一點(diǎn)點(diǎn)。當(dāng)然,載碳量還跟鍵合相的密度有關(guān)系。
5. 這兩者色譜柱間相似的關(guān)鍵參數(shù)較多,所以,無論是在疏水選擇性上,與組分的氫鍵相互作用上都比較相似,可以通用。當(dāng)然,由于載碳量的差異,疏水選擇性上會(huì)有微小的差異;另外,由于兩者不同的孔徑所帶來的比表面積不一致,包括鍵合相密度差異則會(huì)帶來形狀選擇性的差異。
6. zui后,盡管上述色譜柱推薦的ph使用范圍為2——9,但是仍然建議若色譜條件為pH>7,特別是溫度較高的情況,如果條件允許,就不要選擇這兩個(gè)系列的產(chǎn)品了。請(qǐng)選擇耐更高pH的雜化柱。若需要在較強(qiáng)酸性條件下,也建議選擇專門為酸性條件設(shè)計(jì)的色譜柱,當(dāng)然,酸性條件沒有堿性條件帶來的對(duì)柱壽命的影響大,除非是比較極限的條件(如<1)。當(dāng)然,如果您不介意柱壽命,也并非不能在比較極限的情況下使用柱子。從另一個(gè)角度來說,資源的可持續(xù)發(fā)展也要求我們對(duì)現(xiàn)有的資源達(dá)到利用zui大化。
色譜技術(shù)的發(fā)展給我們提供了非常便利的條件。除了傳統(tǒng)的分析柱之外,快速分析柱、兼容于普通HPLC的核殼柱,當(dāng)然還有UPLC/UHPLC柱給我們帶來了較高的通量。我們可以在保證分離足夠的情況下花費(fèi)更短的時(shí)間。在實(shí)際工作過程當(dāng)中,我們也可以有意識(shí)的把某些老的方法轉(zhuǎn)移到更快速的柱子上,以達(dá)到更高的效率。
色譜柱的好壞并不局限,合適的就是好的。
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